Подскажите пожалуйста действенную методику выделения ДНК из клеток крови?

Question

Необходимо разрушить клетки крови и извлечь молекулы ДНК. С помощью каких реактивов и по какой методике можно это осуществить? (просьба не рекомендовать наборы для выделения) . Спасибо.

Answer 1

Можно так попробовать:
1. В микропробирку объемом 1, 5 мл добавляют 38 мкл лизирующего раствора состава 3, 45 М NaOH, 0, 36 М NaCl и 144 мкл 96% этанола, перемешивают на вортексе или вручную.
2. Вносят 10 мкл пробы из 100 мкл суспензии цервикального соскоба в физиологическом растворе, перемешивают на вортексе или вручную и выдерживают при комнатной температуре 15 мин.
3. Центрифугируют 5 мин при 14000 об/мин в микроцентрифуге. Супернатант сливают, остаткам раствора в пробирке дают стечь на фильтровальную бумагу.
4. К осадку на дне пробирки добавляют 500 мкл 80% этанола, осадок промывают, переворачивая пробирку несколько раз и центрифугируют 2 мин при 14000 об/мин. Этанол сливают, пробирку с осадком подсушивают при комнатной температуре на фильтровальной бумаге в течение 10 минут.
5. К осадку добавляют 30 мкл дистиллированной воды и содержимое пробирки перемешивают путем пипетирования в отдельном стерильном наконечнике, после чего проба готова к исследованию в ПЦР. Для проведения ПЦР используют 3 мкл полученного препарата на конечный объем амплификационной смеси 25 мкл.