Как успешно клонировать растение?

Question

Планирую начать клонировать монстеры ради интереса, имется ламинарная камера с фильтрами hepo14, F9. Планирую купить автоклав для стерилизации, авто пипетку, GS среду, гормоны и по мелочи расходники. Что может пойти не так? Что нужно обязательно приобрести? Из каких частей лучше клонировать монстеры и как их найти, нужен будет микроскоп? (В плане если макушки нет, то почку видно, она хорошо набухает на стволе, но как её в стволе макушки искать не знаю) Если у кого-то есть реальный опыт мне не трудно заплатить за советы. Буду благодарен за литературу вот пока мой план:Среда и её стерилизация MS-соли + витамины B5: 4, 43 г/л порошка MS (включая витамины Gamborg B5) Сахароза: 30 г/л Геллан-гум: 2, 5 г/л pH: 5, 6–5, 8 (коректировать 1 N NaOH или HCl до автоклавирования) Разлив: 40 мл среды в каждую баночку до автоклавирования Автоклавирование: 121 °C, 1, 2 кгс/см

Answer 1

1. Что может пойти не так?
Заражение (грибок, бактерии) – если плохо простерилизовал среду или растение.
Почка не прорастает – выбрал мёртвую или слабую.
Гормоны не работают – просроченные или неправильная дозировка.
Среда не застывает – мало геллана или неправильный pH.

2. Что купить обязательно?
Автоклав (или хорошую скороварку) .
Острые лезвия/скальпели (стерильные) .
Пинцеты, спирт, хлорку (для дезинфекции) .
pH-метр (чтобы среда была 5, 6–5, 8) .
Гормоны (6-BAP и NAA) – без них почки не проснутся.

3. Откуда брать почки?
Лучше всего – макушка (верхушка стебля с узлом) .
Если нет макушки – пазушные почки (бугорки на стволе под листьями) .
Как найти? На монстере почки скрыты под сухими чешуйками. Нащупай бугорок – это и есть почка.

Микроскоп не нужен– всё видно глазом.

4. Твой план – норм, но можно проще:
Стерилизация: 70% спирт (30 сек)