Умные вопросы
Войти
Регистрация
Подскажите пожалуйста действенную методику выделения ДНК из клеток крови?
Необходимо разрушить клетки крови и извлечь молекулы ДНК. С помощью каких реактивов и по какой методике можно это осуществить? (просьба не рекомендовать наборы для выделения) . Спасибо.
12 года
назад
от
Алина Демченко
1 ответ
▲
▼
0
голосов
Можно так попробовать:
1. В микропробирку объемом 1, 5 мл добавляют 38 мкл лизирующего раствора состава 3, 45 М NaOH, 0, 36 М NaCl и 144 мкл 96% этанола, перемешивают на вортексе или вручную.
2. Вносят 10 мкл пробы из 100 мкл суспензии цервикального соскоба в физиологическом растворе, перемешивают на вортексе или вручную и выдерживают при комнатной температуре 15 мин.
3. Центрифугируют 5 мин при 14000 об/мин в микроцентрифуге. Супернатант сливают, остаткам раствора в пробирке дают стечь на фильтровальную бумагу.
4. К осадку на дне пробирки добавляют 500 мкл 80% этанола, осадок промывают, переворачивая пробирку несколько раз и центрифугируют 2 мин при 14000 об/мин. Этанол сливают, пробирку с осадком подсушивают при комнатной температуре на фильтровальной бумаге в течение 10 минут.
5. К осадку добавляют 30 мкл дистиллированной воды и содержимое пробирки перемешивают путем пипетирования в отдельном стерильном наконечнике, после чего проба готова к исследованию в ПЦР. Для проведения ПЦР используют 3 мкл полученного препарата на конечный объем амплификационной смеси 25 мкл.
12 года
назад
от
Василий Воробьёв
Связанные вопросы
3
ответов
Я жил в России и перехал в Казахстан и я ставлю Казахстанскую сим карту но симка не работает что делать поскажите?
9 года
назад
от
Sabyrjan@yahoo.com
1
ответ
Дисковая пилорама. Сомнения, не порвало бы полотно
2 года
назад
от
VeronaMazza3
1
ответ
Если светчастотой 550 ТГц (жёлтый) притормозить чёрной дырой , но он всё таки полетит дальше , то измениться ли частота?
1 год
назад
от
EJZNate58390